in vivo Advanced轉染試劑
描述
in vivo Advanced轉染試劑可(ke)以通過靜脈注射(she)或體內局(ju)部組織(zhi)注射(she)的(de)方(fang)式完(wan)成轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)染過程。此外，轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)染過程中總注射(she)體積較小，致密(mi)組織(zhi)可(ke)通過顯微注射(she)來完(wan)成轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)染，且轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)染復合物在體內循環時(shi)間較長(chang)。DNA，siRNA及共(gong)轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)染均可(ke)用此款轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)染試劑(ji)來完(wan)成轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)(zhuan)染操作。
基本條件
DNA
濃(nong)度: 300 ng/ul - 2 μg/ul;
溶劑: 質粒DNA需溶于雙蒸水(shui)或超純水(shui);
內毒(du)素(su): 去內毒(du)素(su)
RNA
濃(nong)度: 20 μM, 40 μM, 60 μM, 80 μM
活體(ti)動物(wu)體(ti)內轉染操作(zuo)步驟
轉染(ran)復(fu)合(he)(he)(he)物制(zhi)備(bei): 核酸和轉染(ran)試劑直(zhi)接按照1:1混合(he)(he)(he)。之(zhi)后用移液器吹打混合(he)(he)(he)溶液10-15次以(yi)充(chong)分(fen)混勻。將(jiang)混合(he)(he)(he)溶液于室溫環境(jing)中(zhong)(zhong)靜置10-15分(fen)鐘，轉染(ran)復(fu)合(he)(he)(he)物即可制(zhi)備(bei)結(jie)束。在復(fu)合(he)(he)(he)物制(zhi)備(bei)過程中(zhong)(zhong)，離心管(guan)的(de)管(guan)壁要(yao)確保沒有液體殘留。
用注(zhu)射器或顯微注(zhu)射針(zhen)完成靜(jing)脈注(zhu)射或局部組織注(zhu)射操作。
注射后3-5天，轉(zhuan)染效率可(ke)達(da)到峰值，靶基因的表(biao)達(da)量可(ke)于(yu)此時進(jin)行檢測(ce)。
活體動物(wu)體內轉染(ran)注射用量
動物 | 注射方式 | 最大注射量(ul) | DNA用量(ug) | siRNA用量(ul) | 轉染(ran)試劑用量(ul) |
新生小鼠 | 腦室內注射 | 2 | 1 | 1 | 1 |
裸鼠 | 尾靜脈注射 | 400 | 62 | 62 | 62 |
腫瘤內注射 | 50 | 17 | 17 | 17 | |
成年小鼠 | 尾靜脈注射 | 400 | 62 | 62 | 62 |
腹腔內注射 | 800 | 100 | 100 | 100 | |
腦室內注射 | 5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 | |
腫瘤內注射 | 50 | 17 | 17 | 17 | |
成年大鼠 | 尾靜脈注射 | 2000 | 505 | 505 | 505 |
腦室內注射 | 25 | 15 | 15 | 15 |
注意事項
DNA (μg) 或20 μM siRNA (μl)與轉染試劑的比(bi)例為1:1。
上表(biao)中siRNA的(de)(de)(de)注(zhu)射體(ti)積是針對20 μM siRNA的(de)(de)(de)。如(ru)果siRNA的(de)(de)(de)濃(nong)度(du)為40 μM，則注(zhu)射體(ti)積需減半(ban)；如(ru)果siRNA的(de)(de)(de)濃(nong)度(du)為80 μM，則注(zhu)射體(ti)積需為表(biao)中體(ti)積的(de)(de)(de)1/4；以此類推。
進行局部組織(zhi)注射實(shi)驗時，轉染(ran)復合物的(de)用(yong)量為(wei)5-10 μl/cm2。
進行(xing)(xing)共轉染實驗時，核(he)(he)酸(suan)(suan)總用(yong)量(liang)應和上(shang)表中用(yong)量(liang)一致(zhi)，各(ge)種(zhong)核(he)(he)酸(suan)(suan)用(yong)量(liang)的比例(li)應根(gen)據實驗目的進行(xing)(xing)調整。之后將各(ge)種(zhong)核(he)(he)酸(suan)(suan)與轉染試(shi)劑進行(xing)(xing)充分混合(he)。
在(zai)具體實驗(yan)操作過程中(zhong)，核酸和轉染試劑的用量可根據上表中(zhong)最大注射用量進行適(shi)當(dang)調整。
訂貨信息
品名 | 貨號 | 規格 |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500025 | 0.25 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500050 | 0.50 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500075 | 0.75 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500150 | 1.50 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500500 | 5.00 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV501000 | 10.00 ml |
深(shen)圳市安培生物科技(ji)有限公司(si)是(shi)美國(guo)ZETA LIFE公司(si)中(zhong)國(guo)代理商。ZETA LIFE轉染(ran)試劑大量(liang)現貨，均經過反(fan)復充分驗證，轉染(ran)效果好且重復性佳，提供完整售后服務和技(ji)術支(zhi)持。尊敬(jing)的客戶您如在訂購過程中(zhong)遇到任(ren)何問題(ti)都可以與我司(si)客戶經理聯(lian)系(xi)尋求幫助(zhu)。
