in vivo Advanced動物體內轉染試劑

1. 描述

   in vivo Advanced動物體內轉染試劑可(ke)以通過(guo)靜脈注(zhu)射或體(ti)內局部組織(zhi)注(zhu)射的(de)方(fang)式完成轉(zhuan)染(ran)(ran)過(guo)程。此外，轉(zhuan)染(ran)(ran)過(guo)程中總注(zhu)射體(ti)積較小，致密組織(zhi)可(ke)通過(guo)顯(xian)微注(zhu)射來完成轉(zhuan)染(ran)(ran)，且轉(zhuan)染(ran)(ran)復合物(wu)在體(ti)內循環時間(jian)較長。DNA，siRNA及共(gong)轉(zhuan)染(ran)(ran)均可(ke)用(yong)此款轉(zhuan)染(ran)(ran)試劑來完成轉(zhuan)染(ran)(ran)操作。

    

2. 基本條件

3. DNA

   濃度: 300 ng/ul - 2 μg/ul;

   溶劑: 質粒DNA需溶于雙蒸(zheng)水(shui)(shui)或超純水(shui)(shui);

   內毒(du)素: 去(qu)內毒(du)素

4. RNA

       濃度(du): 20 μM, 40 μM, 60 μM, 80 μM

    

5. 活(huo)體動物體內轉染操作步(bu)驟

6. 轉(zhuan)染復合物(wu)制備(bei): 核酸和轉(zhuan)染試劑(ji)直接按照1:1混(hun)合。之后用移液器吹打混(hun)合溶液10-15次(ci)以充分混(hun)勻。將混(hun)合溶液于室溫環境(jing)中靜置10-15分鐘，轉(zhuan)染復合物(wu)即(ji)可制備(bei)結(jie)束。在復合物(wu)制備(bei)過程中，離心(xin)管的管壁要確保沒有(you)液體(ti)殘留。

7. 用注射(she)(she)器或顯微注射(she)(she)針完成靜脈注射(she)(she)或局(ju)部組織注射(she)(she)操作。

8. 注射(she)后(hou)3-5天(tian)，轉染效率(lv)可(ke)達到峰值(zhi)，靶基因的表達量(liang)可(ke)于此時進行(xing)檢測。

    

   活體(ti)動物體(ti)內轉染注射用量

    

1. 注意事項

2.  DNA (μg) 或20 μM siRNA (μl)與(yu)轉染(ran)試劑的(de)比例為1:1。

3. 上表(biao)中(zhong)siRNA的(de)注(zhu)射體(ti)積(ji)(ji)是(shi)針對(dui)20 μM siRNA的(de)。如果siRNA的(de)濃度為(wei)40 μM，則注(zhu)射體(ti)積(ji)(ji)需減半；如果siRNA的(de)濃度為(wei)80 μM，則注(zhu)射體(ti)積(ji)(ji)需為(wei)表(biao)中(zhong)體(ti)積(ji)(ji)的(de)1/4；以此(ci)類(lei)推。

4. 進行局部組織注(zhu)射(she)實驗時(shi)，轉染復合物的用量為5-10 μl/cm2。

5. 進行(xing)共轉染實驗時，核(he)酸總用(yong)量應(ying)和上表(biao)中用(yong)量一致(zhi)，各(ge)種(zhong)核(he)酸用(yong)量的比例應(ying)根(gen)據實驗目的進行(xing)調整。之后將各(ge)種(zhong)核(he)酸與(yu)轉染試劑進行(xing)充分混合。

6. 在(zai)具體實驗操(cao)作(zuo)過程中，核酸和轉染試劑的用(yong)量(liang)可(ke)根據(ju)上表中最(zui)大注射用(yong)量(liang)進行適(shi)當調整。

    

7. 訂貨信息

    

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