in vivo Advanced活體動物體內轉染試劑

1. 描述

   in vivo Advanced活體動物體內轉染試劑可(ke)(ke)以(yi)通(tong)過(guo)靜脈注(zhu)(zhu)射(she)或體內(nei)(nei)局部組織注(zhu)(zhu)射(she)的方(fang)式完(wan)成轉染(ran)(ran)過(guo)程(cheng)。此(ci)外，轉染(ran)(ran)過(guo)程(cheng)中總注(zhu)(zhu)射(she)體積(ji)較小，致密組織可(ke)(ke)通(tong)過(guo)顯微注(zhu)(zhu)射(she)來完(wan)成轉染(ran)(ran)，且轉染(ran)(ran)復合(he)物(wu)在體內(nei)(nei)循環時間較長。DNA，siRNA及共轉染(ran)(ran)均(jun)可(ke)(ke)用此(ci)款轉染(ran)(ran)試劑來完(wan)成轉染(ran)(ran)操作。

    

2. 基本條件

3. DNA

   濃度: 300 ng/ul - 2 μg/ul;

   溶(rong)劑: 質(zhi)粒DNA需溶(rong)于雙蒸水或(huo)超純水;

   內(nei)毒(du)素: 去(qu)內(nei)毒(du)素

4. RNA

       濃度(du): 20 μM, 40 μM, 60 μM, 80 μM

    

5. 活(huo)體動物體內轉染(ran)操作步(bu)驟

6. 轉染復合(he)物制(zhi)備(bei): 核酸和轉染試劑(ji)直接按照1:1混合(he)。之后用移液(ye)(ye)器吹(chui)打混合(he)溶液(ye)(ye)10-15次(ci)以充分(fen)混勻。將(jiang)混合(he)溶液(ye)(ye)于(yu)室溫環(huan)境中(zhong)靜(jing)置10-15分(fen)鐘，轉染復合(he)物即可制(zhi)備(bei)結(jie)束。在復合(he)物制(zhi)備(bei)過程中(zhong)，離心管(guan)的管(guan)壁要確保沒有液(ye)(ye)體殘留。

7. 用注(zhu)射(she)器或顯微注(zhu)射(she)針完成(cheng)靜(jing)脈注(zhu)射(she)或局部組(zu)織注(zhu)射(she)操(cao)作。

8. 注(zhu)射后3-5天(tian)，轉染效率可(ke)達到峰值，靶基因的表達量(liang)可(ke)于此時進行檢(jian)測。

    

   活(huo)體動物(wu)體內轉(zhuan)染注射(she)用量(liang)

    

1. 注意事項

2.  DNA (μg) 或20 μM siRNA (μl)與(yu)轉染試劑的(de)比例為1:1。

3. 上(shang)表中siRNA的注(zhu)射體(ti)積(ji)是針對20 μM siRNA的。如(ru)果siRNA的濃(nong)(nong)度為(wei)40 μM，則注(zhu)射體(ti)積(ji)需減半；如(ru)果siRNA的濃(nong)(nong)度為(wei)80 μM，則注(zhu)射體(ti)積(ji)需為(wei)表中體(ti)積(ji)的1/4；以(yi)此(ci)類推(tui)。

4. 進(jin)行(xing)局部組織注射實驗時，轉染復合物的(de)用(yong)量為5-10 μl/cm2。

5. 進行共(gong)轉染(ran)實驗(yan)時，核酸總用(yong)量(liang)應和(he)上表中(zhong)用(yong)量(liang)一致，各種(zhong)核酸用(yong)量(liang)的比例(li)應根據實驗(yan)目的進行調整。之后將各種(zhong)核酸與(yu)轉染(ran)試劑進行充(chong)分混(hun)合。

6. 在(zai)具(ju)體(ti)實驗(yan)操作過(guo)程中，核酸和轉(zhuan)染試劑的用量可根據上表中最(zui)大注射(she)用量進行(xing)適(shi)當調整。

    

7. 訂貨信息

    

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