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    兔源抗體

    發布時間: 2023-04-28  點擊次數: 63次

    兔IgG只有一種亞型

    人和小鼠都有(you)(you)五種抗體類型(xing)(xing)(IgA,IgD,IgE,IgG,and IgM)。目前為(wei)止,已經在兔(tu)中發現其中的四種(IgA,IgE,IgG,and IgM)。有(you)(you)趣的是(shi),人有(you)(you)兩種IgA亞型(xing)(xing),小鼠有(you)(you)一種,而(er)兔(tu)子共有(you)(you)14種IgA亞型(xing)(xing)。


    研究用的抗體主要是IgG類型。兔只有一種IgG亞型,而小鼠有IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c和IgG3亞(ya)型,大鼠有(you)IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG2c亞(ya)型。表一(yi)列出了兔抗體類型,亞(ya)型,基因名稱(cheng)及導向NCBI和IMGT基因數據庫的鏈接。

    表一:兔抗體類型、亞型及相應基因

    抗體類型亞(ya)型NCBI登錄(lu)號IMGT 基因名
    IgAIgA1, IgA2, IgA3, IgA4, IgA5, IgA6, IgA7, IgA8, IgA9, IgA10, IgA11, IgA12, IgA13, IgA14只以IgA1為例說(shuo)明。 X51647IGHA
    IgE
    AY386696IGHE
    IgG
    L29172IGHG
    IgM
    J00666IGHM

    兔抗體分子量

    不同(tong)(tong)類(lei)型及不同(tong)(tong)亞型的(de)抗體具有(you)不同(tong)(tong)的(de)分(fen)子量,因(yin)為1)鏈(lian)間二硫鍵的(de)數目不同(tong)(tong),2)鏈(lian)間二硫鍵引起(qi)的(de)免疫球蛋(dan)白(bai)分(fen)子的(de)寡聚化程度不同(tong)(tong);3)重(zhong)鏈(lian)區的(de)免疫球蛋(dan)白(bai)域的(de)數目不同(tong)(tong)。


    常見的兔IgG型的在非還原條件下分子量為150KD,含有兩個重鏈(各約50KD)和兩個輕鏈(各約25KD)。在還原條件下,重鏈和輕鏈的分子量分別為50和25KD。


    兔抗體的制備

    兔多克隆抗體的制備

    兔是多(duo)克隆抗體(ti)中(zhong)主(zhu)要的動物宿主(zhu),因為兔子個(ge)頭小,繁殖周期短,與大部分研(yan)究用模式生物有較大的種間距,以及(ji)有非(fei)常成熟的抗體(ti)制備工藝。截(jie)止2014年12月10日,Labome抗體(ti)庫匯集的308060兔多(duo)克隆抗體(ti),分別靶向18302個(ge)人基(ji)因,13199個(ge)小鼠基(ji)因,及(ji)10923個(ge)大鼠基(ji)因。


    在抗(kang)體供(gong)(gong)應商中(zhong)非(fei)常普遍(即,不同的(de)(de)供(gong)(gong)應商為同樣的(de)(de)抗(kang)體試劑使用不同的(de)(de)產品(pin)(pin)目錄號)。來邦網(wang)是一家努力減少重塑品(pin)(pin)牌的(de)(de)抗(kang)體試劑數量(liang)的(de)(de)平臺。


    兔單克(ke)隆抗體的制備(bei)

    在(zai)過去的幾十年里,人們一直(zhi)在(zai)努(nu)力制備兔單克(ke)隆抗體(ti)。對于在(zai)嚙齒動(dong)物(wu)中沒有免(mian)疫(yi)原性的抗原來說,這(zhe)種方法(fa)是特別重要(yao)的。最初是通(tong)過c-myc和(he)v-abl的轉基(ji)(ji)因(yin)兔子產生漿(jiang)細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao)系,進而得到(dao)兔單克(ke)隆抗體(ti)。目前一些公司主要(yao)是利用專用技術生產兔單抗。截止2012年12月10日, Labome抗體(ti)庫(ku)匯集的18692兔單克(ke)隆抗體(ti), 分別靶向(xiang)3112個人基(ji)(ji)因(yin), 2149個小鼠(shu)基(ji)(ji)因(yin), 及(ji)1814個大鼠(shu)基(ji)(ji)因(yin)。

    兔單(dan)抗和(he)小鼠單(dan)抗的優劣對比

    已有(you)數個研究來比(bi)較兔(tu)(tu)單抗(kang)(RabMAb)和小鼠(shu)(shu)單抗(kang)的(de)特點。2005年(nian), Sabrina Rossi等發(fa)表(biao)了一組比(bi)較研究,以多種(zhong)腫(zhong)瘤組織和正常組織為實驗材料(liao),檢測常規的(de)免疫組化診(zhen)斷(duan)中雌(ci)激素受體(ti), 孕激素受體(ti), Ki-67, cyclin D1, CD3, CD5, CD23, 和synaptophysin的(de)兔(tu)(tu)單抗(kang)和小鼠(shu)(shu)單抗(kang)的(de)染色情(qing)況(kuang)。結(jie)果表(biao)明,和小鼠(shu)(shu)單抗(kang)相比(bi),兔(tu)(tu)單抗(kang)具有(you)相似的(de)特異(yi)性,且具有(you)較高的(de)靈敏度,這(zhe)允許兔(tu)(tu)單抗(kang)有(you)較高的(de)稀釋比(bi)(平均5到10倍);此外,一些情(qing)況(kuang)下(xia),為了達到更(geng)好(hao)的(de)染色效果,也(ye)不需要抗(kang)原修復操作 。2008年,Rafael Rocha et al.的研究也支持這一結論 。但是(shi),Jose G. Vilches-Moure 和 Jose A. Ramos-Vara 以甲醛固定,石蠟(la)包埋的(de)犬組織為實(shi)驗材料,發現兔單(dan)抗和小鼠(shu)單(dan)抗都(dou)識別COX-2, Ki67, synaptophysin, 和vimentin;但是(shi),只(zhi)有兔單(dan)抗能(neng)檢測出CD3, chromogranin A, 和孕激素受(shou)體, 而只(zhi)有小鼠(shu)單(dan)抗能(neng)檢測出CD79a, calcitonin, 和雌激素受(shou)體

    抗兔的二抗

    Labome的調查(cha) 二抗表明,山羊(yang)、綿羊(yang)和驢(lv)都是(shi)制備抗(kang)兔二抗(kang)的常用(yong)宿主(zhu)。

    抗(kang)兔(tu)基因的(de)抗(kang)體

    雖不像嚙(nie)齒動物(wu)那樣常用,兔(tu)也是一種非常有研(yan)(yan)究價值的(de)(de)(de)動物(wu)。兔(tu)子(zi)是研(yan)(yan)究腫瘤發生(sheng), 損傷(shang)和創傷(shang)修復, 及其它一些應用的(de)(de)(de)很好的(de)(de)(de)模式(shi)生(sheng)物(wu)。

    兔網織紅細(xi)胞(bao)裂解液常用于體(ti)外無細(xi)胞(bao)翻譯體(ti)系 。截(jie)止(zhi)2012年12月10日,Labome抗體庫匯(hui)集了靶向38個(ge)兔基因的(de)單(dan)抗,36個(ge)兔基因的(de)多(duo)抗。

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