細胞的體外培養需要依附在人工附著物上，大多數脊椎動物細胞在人工附著物上會呈現為單層生長的狀態。

所謂的人工附(fu)著物，就是(shi)常(chang)見(jian)的多孔板(ban)、培養瓶、培養皿(min)。

用(yong)什(shen)么類型的附(fu)著物來培養細胞，是有什(shen)么依據的呢？這(zhe)一期內容就(jiu)講講這(zhe)個話題。

基本概念

從材料(liao)分類上(shang)看，常見(jian)的(de)細胞培養附(fu)著(zhu)物(wu)分為一(yi)次性(xing)的(de)塑料(liao)和玻璃(li)。

先(xian)說玻璃，成(cheng)本低、可重復使用，透光性好，但由于(yu)其清洗(xi)過程復雜，不易保存，現(xian)在已逐漸被一次性塑料(liao)取(qu)代了。

一次性塑料的(de)主要成份(fen)是聚丙(bing)乙烯(xi)，由人工合成，質地均勻(yun)，產(chan)量大成本低，能為細胞(bao)提供一(yi)個良好的生長(chang)表(biao)面。

這里有(you)一個小細節，有(you)的塑料培養器皿會標(biao)注“已表面處理“，這是什么意思(si)呢？

因為聚丙乙(yi)烯生產好以(yi)后，其表面是疏水性(xing)的，這不利于細胞貼壁生長，因此，需要(yao)進行特殊的工藝處理，例(li)如射線(xian)照射、電離輻射，這樣處(chu)理過的(de)表面細胞才能更好(hao)的(de)貼在上面生長。

選擇器皿的原則

選擇用多孔板(ban)培養(yang)細(xi)胞(bao)還是培養(yang)瓶培養(yang)細(xi)胞(bao)，是根據你培養(yang)細(xi)胞(bao)的目的來(lai)決定的。

如果培(pei)(pei)養(yang)細(xi)(xi)胞(bao)的目的是通過細(xi)(xi)胞(bao)倍增，最終獲得大量細(xi)(xi)胞(bao)或(huo)細(xi)(xi)胞(bao)分泌物，則應該使用(yong)培(pei)(pei)養(yang)皿(min)、培(pei)(pei)養(yang)瓶來培(pei)(pei)養(yang)細(xi)(xi)胞(bao)。

如(ru)果目的(de)是為(wei)了進行(xing)微量的(de)、多次的(de)重復實驗來分析細(xi)胞或細(xi)胞產(chan)物，則應(ying)該使用多孔板來培(pei)養(yang)。

確定(ding)培養(yang)目的以后，應該根據具體情況(kuang)選擇不同(tong)規格的器皿。以下分類說(shuo)明。

1 選擇(ze)培(pei)養(yang)瓶、培(pei)養(yang)皿培(pei)養(yang)細胞

首先，根(gen)據期望獲(huo)得的細胞(bao)產(chan)量(liang)來(lai)選擇，培養瓶是(shi)通過(guo)表面(mian)積來(lai)命(ming)名的，例如(ru)T25、T75、T175，數字(zi)就(jiu)是(shi)表面(mian)積，25就(jiu)是(shi)25cm2，如(ru)此類推(tui)；

培養(yang)(yang)皿是按照其直(zhi)徑來(lai)命名的，例如3.5cm、9cm。以下，是按照不同規格的培養(yang)(yang)器(qi)皿所能培養(yang)(yang)的細胞數量繪制的參考(kao)圖，有興趣的同學可以保存下來(lai)以后用。

其次，根據實驗操作熟練(lian)程度(du)來選擇，培養皿(min)的操作比較方便，不管是(shi)換液(ye)、傳代、還(huan)是(shi)收獲細(xi)胞，但因為其開口很大，所以容易污染，如果你是(shi)新(xin)手，不建議(yi)直接用(yong)培養皿(min)養細(xi)胞。

最后，如果選擇培(pei)養瓶(ping)培(pei)養，還(huan)應該盡量選擇有斜肩設計、帶透(tou)氣(qi)孔瓶(ping)蓋的型(xing)號。

前者可以(yi)避免培(pei)養瓶平放后，過多的(de)培(pei)養基接(jie)觸瓶蓋造成污(wu)染，后者可以(yi)保持內外的(de)二氧(yang)化碳濃度一致(zhi)。

如果瓶(ping)蓋不透氣，那在放進(jin)培(pei)養(yang)箱時，應擰松一圈，以便內(nei)外氣體能順利(li)交換。

2 選擇多孔板培養細胞

首先(xian)，也(ye)是要判斷你的(de)實驗需要多少細胞來進行分析，以此來選擇多孔板的(de)規(gui)格。大家(jia)同樣可以參(can)照(zhao)上(shang)面(mian)的(de)圖表。

有極個(ge)別的(de)(de)孔板(ban)，孔底部是錐(zhui)形底或圓(yuan)底，這種規格的(de)(de)多孔板(ban)適(shi)用(yong)于非組織型的(de)(de)細胞培(pei)養(yang)，對于大多數貼壁生長(chang)的(de)(de)細胞來說不適(shi)合。

選擇好合(he)適的孔板后，在培養階段，有2點注(zhu)意(yi)事項：

A 多(duo)孔(kong)板會帶板蓋，但其密封性不好，在培養(yang)箱內會造成邊緣的孔(kong)位(wei)蒸發效率過高，進而(er)影響(xiang)細胞(bao)生長(chang)速率。

有(you)條件的同學，可以在(zai)(zai)蓋上(shang)板蓋后(hou)在(zai)(zai)縫隙(xi)處貼一(yi)圈封口膜。或者舍棄邊緣孔位，并采用添加培(pei)養基來代(dai)替(ti)。

B 當細胞(bao)種入孔(kong)內以后，不應(ying)該再進行過多的震(zhen)動(dong)，例如晃動(dong)、抖動(dong)培養板，而應(ying)該輕緩(huan)的放入培養箱中。

如果(guo)培養箱由多人共用(yong)，還應該考慮大家頻繁開關箱門(men)、拿放(fang)孔板(ban)造成的震(zhen)動，這(zhe)些不利因素都應該盡量(liang)減少。

以上就(jiu)是本期的內容，更多資訊(xun)，。

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