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    細胞共培養實驗步驟、技巧,Transwell or Millicell?

    發布時間: 2023-04-23  點擊次數: 101次

    實驗目的:

    研究兩種或(huo)三種細胞之間的相互作用


    實驗簡介:

    共培養(yang)是通過(guo)分別在插入式細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培養(yang)小室內外培養(yang)兩(liang)種或以上細(xi)(xi)胞(bao)(bao),來研究細(xi)(xi)胞(bao)(bao)之間的相互作(zuo)用(yong),例如不同CD亞型的免(mian)疫(yi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、免(mian)疫(yi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)和腫(zhong)瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、飼養(yang)層和干(gan)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)等(deng)。因此,在免(mian)疫(yi)、腫(zhong)瘤、干(gan)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)等(deng)領域都(dou)有廣(guang)泛應(ying)用(yong)。


    方法1

    1. 將小室放(fang)在24孔板(ban)里,用(yong)培養基(ji)潤濕膜。

    2. 反轉小室,底面(mian)朝上,加入約200μL細(xi)胞懸(xuan)液,置于(yu)37℃細(xi)胞培養(yang)箱培養(yang)1-4小時,使(shi)細(xi)胞貼膜。

    3. 輕輕將小室(shi)正立在培(pei)養(yang)(yang)板孔里(li)(li),在小室(shi)里(li)(li)層種(zhong)第二種(zhong)細胞,并在小室(shi)里(li)(li)面和(he)外面都(dou)加(jia)培(pei)養(yang)(yang)基,繼(ji)續培(pei)養(yang)(yang)至細胞貼膜。

    4. 依照實驗(yan)目的(de)加入各種刺激或者繼續(xu)培養細(xi)胞。


    方法2

    1.  將小(xiao)室(shi)正(zheng)放在(zai)(zai)24孔板里(li),先在(zai)(zai)小(xiao)室(shi)里(li)面(mian)鋪一種細(xi)胞(bao),在(zai)(zai)細(xi)胞(bao)培(pei)養箱里(li)面(mian)培(pei)養至(zhi)細(xi)胞(bao)貼膜。

    2. 反轉(zhuan)小室,底面(mian)朝上,置于一(yi)個(ge)新(xin)的培養皿上,鋪第二種細胞, 體(ti)積稍微(wei)小一(yi)點(100-200uL),培養1-4小時使細胞貼膜。

    3. 最后再輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)將小室正立(li)在24孔(kong)板(ban)里,繼(ji)續培(pei)養細胞或者(zhe)加入刺激。


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