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    細胞的STR鑒定

    發布時間: 2021-12-16  點擊次數: 733次

          做實(shi)(shi)(shi)驗(yan)(yan)的(de)時(shi)候(hou)才發(fa)(fa)現(xian)細(xi)胞的(de)種類太(tai)多,于是我們(men)需(xu)要(yao)(yao)查詢各(ge)種文(wen)獻看每(mei)個細(xi)胞的(de)特征(zheng),從而設計(ji)實(shi)(shi)(shi)驗(yan)(yan)規(gui)劃與(yu)步鄹,我們(men)在緊湊的(de)實(shi)(shi)(shi)驗(yan)(yan)種完-美了(le)實(shi)(shi)(shi)驗(yan)(yan),提交(jiao)文(wen)章的(de)時(shi)候(hou),才發(fa)(fa)現(xian),需(xu)要(yao)(yao)細(xi)胞鑒定。

          據統計約30%細胞系被交叉污染或錯誤辨識,因使用了交叉污染或錯誤辨識的細胞而導致研究結論錯誤、結果不可重復、臨床細胞治療災難性后果……這浪費大量時間、精力和金錢。因此NIH、ATCC等權-威機構多次發出呼吁,要求研究者對細胞進行鑒定,最近美媒報道1/6科學家在研究使用“假-冒"細胞,2014年12月、2015年2月Science雜志分別發表文章專題闡述細胞交叉污染和錯誤辨識的嚴重性;2015年4月Nature通知:Nature旗下所有雜志將要求作者鑒定論文中所用細胞系;2015年6月即有報道稱一科學家因用錯細胞系,撤銷Nature論文。NIH、ATCC、Nature和Science等機構對此多次發出呼吁,要求研究者對細胞進行鑒定,STR基因分型已被作為金標準應用于細胞系鑒定,越來越多雜志開始要求投稿人提供細胞STR鑒定結果。

         在2011年美國就已(yi)經頒布了細(xi)胞STR鑒(jian)定(ding)(ding)國家標(biao)準(ANSI/ATCC ASN-0002-2011)。目前STR檢測已(yi)被廣(guang)泛應(ying)用于(yu)親(qin)子鑒(jian)定(ding)(ding)、個體識(shi)別、細(xi)胞來源判定(ding)(ding)等方(fang)面。ATCC、DSMZ、JCRB等國際知-名細(xi)胞庫已(yi)將STR基因(yin)分型列為細(xi)胞鑒(jian)定(ding)(ding)的(de)金標(biao)準。

         STR鑒(jian)定已經成為了細(xi)胞株的(de)“身-份-證"能在科(ke)研界通行(xing)無(wu)阻,必(bi)須要有STR。那么動物源呢,因(yin)為建(jian)立的(de)DNA條帶并不完(wan)善,目前只有小鼠(shu)的(de)部分細(xi)胞可(ke)以提(ti)供STR。

    STR鑒定描述:

          利用(yong)熒(ying)光(guang)標記(ji)擴增產(chan)物(wu)長度(du)多態(tai)(tai)分(fen)析(xi)方法對細胞(bao)樣本進行(xing)9個(ge)/16個(ge)STR位點(dian)進行(xing)分(fen)型。設計PCR引物(wu),組成2個(ge)PANEL用(yong)于擴增多態(tai)(tai)位點(dian)。位點(dian)的(de)熒(ying)光(guang)標記(ji)采用(yong)引物(wu)上標記(ji)5’FAM熒(ying)光(guang)標記(ji)。引物(wu)用(yong)在線Primer3 軟件設計。PCR產(chan)物(wu)稀釋(shi)后取(qu)少量與內標標記(ji)混勻(yun)后直接上ABI 3130xl進行(xing)毛(mao)細管電(dian)泳(yong),數據(ju)文(wen)件用(yong)GeneMapper4.0(Appliedbiosystems)來分(fen)析(xi)。

        STR(Short Tandem Repeat,短串(chuan)聯(lian)重復序(xu)列(lie))是一類廣泛(fan)存在于真核生物基因組中的DNA串(chuan)聯(lian)重復序(xu)列(lie),由于其(qi)核心(xin)序(xu)列(lie)重復次(ci)數存在個體差異(yi)多態性(xing),因此STR也被稱為細胞的DNA指紋。


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