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    內皮細胞的培養方法及內皮微粒的表達

    發布時間: 2020-09-28  點擊次數: 1395次

    內皮細胞是每個組織中不可少的傳導工具,包括萬惡的腫瘤,也是在(zai)初發階段,血管先擴(kuo)增一(yi)波,從而大面積進攻組織,內皮細胞怎么(me)提取培養呢?

    原代內(nei)皮細(xi)胞(bao)分離一般采用的(de)是組(zu)織酶(mei)消化(hua)法,不(bu)要天真的(de)以為您只(zhi)要酶(mei)消化(hua)下來(lai)(lai)的(de)細(xi)胞(bao)都是內(nei)皮細(xi)胞(bao)了 ,有可能也有成(cheng)纖維細(xi)胞(bao)哦(e) ,這(zhe)就(jiu)牽扯到怎么抑制(zhi)成(cheng)纖維細(xi)胞(bao)的(de)生(sheng)長,讓(rang)內(nei)皮細(xi)胞(bao)趕快(kuai)成(cheng)長起來(lai)(lai)的(de)方(fang)法了。

    內皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)一般(ban)采(cai)用內皮(pi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)*培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)來維持細(xi)(xi)胞(bao)(bao)生長,需要注(zhu)意的(de)(de)是(shi)才(cai)分(fen)(fen)離出來的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)一般(ban)都不會(hui)采(cai)用無(wu)血(xue)(xue)清(qing)(qing)的(de)(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)培(pei)養(yang)(yang),因為(wei)無(wu)血(xue)(xue)清(qing)(qing)的(de)(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)可能會(hui)導(dao)致(zhi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)會(hui)有(you)不貼壁(bi)的(de)(de)現象發生,需要更(geng)換無(wu)血(xue)(xue)清(qing)(qing)培(pei)養(yang)(yang)方式需等(deng)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)穩(wen)定后才(cai)可開始更(geng)換無(wu)血(xue)(xue)清(qing)(qing)組分(fen)(fen),按(an)比列循序漸進更(geng)適合細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)生長,這也(ye)是(shi)有(you)些老師在(zai)提取原代的(de)(de)時候使(shi)用細(xi)(xi)胞(bao)(bao)包被液包被培(pei)養(yang)(yang)瓶的(de)(de)原因。 

      內皮細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)培養(yang)(yang)的時(shi)候對培養(yang)(yang)基(ji)(ji)的要求很(hen)高,即使是細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)株(zhu)HMEC-1也(ye)必須(xu)要使用(yong)MCDB這(zhe)種不(bu)是很(hen)常規(gui)的基(ji)(ji)礎培養(yang)(yang)基(ji)(ji) ,然后加(jia)血清,加(jia)EGF,加(jia)胰島(dao)素(su)才能好(hao)好(hao)生長,所以細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)培養(yang)(yang)方(fang)式不(bu)對 ,努(nu)力就會白費,不(bu)要用(yong)很(hen)激進的方(fang)法去改變(bian)任何細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的培養(yang)(yang)方(fang)式 ,因為這(zhe)樣會讓細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的部分(fen)基(ji)(ji)因丟失從而導致細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)變(bian)異;內皮細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)培養(yang)(yang)需要勤(qin)換液,因為他們的分(fen)泌比較多,特別在代次不(bu)好(hao)的時(shi)候會很(hen)明顯。

       原代內皮細胞(bao)一個特別顯著(zhu)的(de)(de)特征(zheng)就(jiu)是在細胞(bao)代次比(bi)較好的(de)(de)時(shi)候它們消化需(xu)要的(de)(de)時(shi)間特別短,彷佛這邊才(cai)加上胰酶(mei)(mei)那邊就(jiu)馬(ma)上需(xu)要終止(zhi)了 ,對胰酶(mei)(mei)比(bi)較敏感(gan),而傳(chuan)代次數太多的(de)(de)細胞(bao)或者內皮細胞(bao)株就(jiu)表現(xian)不一樣(yang)了 ,加上胰酶(mei)(mei)之后它就(jiu)像個沒有睡醒的(de)(de)孩(hai)子一樣(yang) “吹吹打(da)打(da)"才(cai)能下來。

    內皮微粒具(ju)有轉運蛋(dan)白、RNA等信號分子的功(gong)能(neng),在調節(jie)血栓形成、動脈粥樣硬化發生、炎(yan)癥(zheng)反應、血管功(gong)能(neng)中發揮著重要作用。

      內(nei)(nei)皮(pi)(pi)(pi)微粒(li)(li)表達(da)(da)很多(duo)內(nei)(nei)皮(pi)(pi)(pi)特異性的(de)分子(zi),如CD31、CD146、CD62E、CD51 CDl44, 凋(diao)亡誘(you)導(dao)下的(de)內(nei)(nei)皮(pi)(pi)(pi)微粒(li)(li)CD31、CDl05表達(da)(da)增(zeng)加(jia)(jia),促活化因(yin)子(zi)誘(you)導(dao)下CD54、CD62E表達(da)(da)增(zeng)加(jia)(jia);促血(xue)栓形(xing)成狀(zhuang)態下,內(nei)(nei)皮(pi)(pi)(pi)微粒(li)(li)表面(mian)的(de)促凝(ning)血(xue)因(yin)子(zi)active tissue factor (TF) 、platelet factor 3表達(da)(da)增(zeng)加(jia)(jia)。由于內(nei)(nei)皮(pi)(pi)(pi)微粒(li)(li)表面(mian)攜(xie)帶有大量內(nei)(nei)皮(pi)(pi)(pi)細(xi)胞(bao)的(de)表面(mian)蛋(dan)白和(he)生物(wu)信(xin)息(xi),在不(bu)同的(de)病理(li)和(he)生理(li)情況(kuang)(kuang)下表達(da)(da)情況(kuang)(kuang)發生改變,是(shi)非侵(qin)襲性的(de)監測內(nei)(nei)皮(pi)(pi)(pi)細(xi)胞(bao)功能的(de)潛(qian)在標志(zhi)。

      內(nei)皮細(xi)(xi)胞(bao)也(ye)是目(mu)前研(yan)究使用最(zui)多的(de)原代(dai)(dai)細(xi)(xi)胞(bao),這和它的(de)功能密(mi)不可分(fen),cell systems提供37種原代(dai)(dai)內(nei)皮細(xi)(xi)胞(bao),細(xi)(xi)胞(bao)不采(cai)用抗(kang)體分(fen)選細(xi)(xi)胞(bao)無抗(kang)性 ;單管(guan)細(xi)(xi)胞(bao)達100萬(wan)以上(shang)的(de)細(xi)(xi)胞(bao)量(liang),減(jian)少您實驗購買細(xi)(xi)胞(bao)的(de)經費。


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